Diffuus groot B-cel lymfoom met een moleculair PMBCL expressiesymbool is een duidelijk te onderscheiden moleculair subtype dat geassocieerd is met een slecht klinisch resultaat

Inleiding: De recent ontwikkelde DLBCL90 NanoString-assay onderscheidt op robuuste wijze primair mediastinaal groot B-cellymfoom (PMBCL) van diffuus groot B-cellymfoom (DLBCL), evenals cell-of-origin (COO) subtypen van DLBCL (ABC, GCB, niet-geclassificeerd) en gevallen met een Double-Hit (DHIT) signatuur (Ennishi D., JCO 2019). Toen deze assay werd toegepast op biopten van 343 patiënten met de novo DLBCL die uniform werden behandeld met R-CHOP, hadden negentien van deze gevallen een moleculaire PMBCL-handtekening (mPMBCL), ondanks het feit dat ze op basis van hun morfologie, immunofenotype en klinische kenmerken als DLBCL werden gediagnosticeerd. Het doel van deze studie was om de moleculaire en klinisch-pathologische kenmerken van deze mPMBCL gevallen uitvoerig te karakteriseren.

Methoden: Overlevingsschattingen werden berekend met behulp van Kaplan-Meier analyse, waarbij tijd tot progressie (TTP) en ziektespecifieke overleving (DSS) als eindpunten werden gebruikt. We pasten whole-exome sequencing, kopiegetalanalyse (SNP6.0) en RNAseq toe om respectievelijk somatische mutaties, kopiegetalafwijkingen en differentieel tot expressie komende genen te identificeren. FISH werd toegepast om de aanwezigheid van herschikkingen met betrekking tot MYC, BCL2 en BCL6 te beoordelen. We gebruikten eerder binnen ons centrum verkregen gegevens van een PMBCL-cohort (n=73) om mPMBCL te vergelijken met “bonafide” PMBCL-tumoren (PMBCL) (Mottok et al, Blood 2019).

Resultaten: Mediane leeftijd bij diagnose was significant hoger voor mPMBCL vergeleken met PMBCL (62 vs 37 jaar, p<.001). Slechts 3 van de 19 mPMBCL presenteerden zich met een anterieure mediastinale massa, een klinisch kenmerk van PMBCL. Belangrijk is dat deze gevallen uitgebreide extrathoracale ziekte vertoonden, hetgeen ongebruikelijk is voor PMBCL. Pleurale en/of pericardiale effusie werd gezien in slechts 11% van de mPMBCL vergeleken met 50% van de PMBCL (p<.001). Betrokkenheid van het beenmerg werd gezien in 21% van de mPMBCL en in geen enkele PMBCL (p<.001). De mPMBCL hadden een trend naar slechtere uitkomsten vergeleken met de met R-CHOP behandelde PMBCL (n=61) (2-jaars TTP: 62% vs 77%, log-rank p=.12; DSS: 74% vs 84%, p=.10). Door COO toewijzing van de DLBCL90 assay, werden 16 van de 19 mPMBCL gecategoriseerd als GCB-DLBCL. Vergeleken met de andere GCB-DLBCL in ons DLBCL cohort (exclusief DHIT-handtekening-positieve gevallen), hadden de mPMBCL inferieure uitkomsten (2-jaars TTP: 62% vs 87%, log-rank p=.03; DSS: 72% vs 89%, p=.02). Er waren geen significante verschillen in klinische basiskenmerken tussen mPMBCL en GCB-DLBCL.

Vergelijking van het mutatielandschap van mPMBCL met PMBCL toonde verstoringen aan in de centrale kenmerken van de pathogenese van PMBCL: JAK/STAT signalering, NF-ĸB pathway activering en immuun ontwijking. Genomische afwijkingen die JAK-STAT signalering beïnvloeden werden gedeeld tussen mPMBCL en PMBCL, met SNVs of indels die IL4R, STAT6 en SOCS1 beïnvloeden, gevonden in respectievelijk 37%, 37% en 89% van mPMBCL en 36%, 40% en 69% van PMBCL. Bovendien toonde kopiegetalanalyse JAK2-amplificaties aan in 44% van de mPMBCL (71% van de PMBCL) en differentiële genexpressieanalyse toonde verhoogde niveaus van CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) en genen die behoren tot het JAK-STAT-signaleringsnetwerk in mPMBCL. Deze genetische afwijkingen werden daarentegen zelden waargenomen in een recente whole-exome sequencing studie op 304 primaire DLBCL tumoren (Chapuy B., Nat.Med. 2018). Mutaties werden ook waargenomen in NF-ĸB-paden, maar de mutatiepatronen waren verschillend tussen mPMBCL (BIRC3 en BTK) en PMBCL (NKBIE), wat convergente biologie suggereert met alternatieve mechanismen van ontregeling van de paden. Ook vertoonden mPMBCL andere mutaties (CD83) die een rol spelen bij immuunontwijking dan PMBCL (B2M).

Ten slotte vergeleken we het mutatielandschap van mPMBCL met recent beschreven genetisch gedefinieerde subgroepen van DLBCL. Interessant is dat een grote meerderheid van de mPMBCL ten minste één van de mutaties bevatte die kenmerkend zijn voor “Cluster 4” (o.a. CD83, HIST1H1E, SGK1), een door Chapuy et al. gedefinieerde subgroep van DLBCLs die voornamelijk GCB-DLBCLs omvat.

Conclusie: Wij hebben een subgroep van DLBCL geïdentificeerd en gekarakteriseerd die de PMBCL genexpressie signatuur tot expressie brengt. Net als bonafide PMBCL worden deze tumoren gekarakteriseerd door genomische afwijkingen die JAK-STAT, NF-ĸB signalering en immuunrespons beïnvloeden. Onze gegevens suggereren echter dat de ontregeling van deze laatste twee pathways tot stand komt via verschillende evolutionaire modaliteiten die tot uiting komen in verschillende mutatiepatronen en anatomische en klinische presentaties. Onze bevindingen bieden mogelijk nieuwe therapeutische mogelijkheden voor deze subgroep van lymfoom.

Sarkozy:Takeda: Financiering van onderzoek. Savage: BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier, en Seattle Genetics: Consultancy, honoraria; Seattle Genetics, Inc: Consultancy, Honoraria, Onderzoeksfinanciering. Scott: Celgene: Consultancy; Roche/Genentech: Onderzoeksfinanciering; Janssen: Consultancy, onderzoeksfinanciering; NanoString: Octrooien & Royalty’s: Genoemd als uitvinder van een octrooi dat in licentie is gegeven aan NanoSting , Onderzoeksfinanciering. Steidl:Bristol-Myers Squibb: financiering van onderzoek; Nanostring: Octrooien & Royalty’s: Octrooi aangevraagd in naam van BC Cancer; Juno Therapeutics: Consultancy; Tioma: Onderzoeksfinanciering; Roche: Consultancy; Bayer: Consultancy; Seattle Genetics: Consultancy.