Les lymphomes diffus à grandes cellules B présentant une signature d’expression moléculaire PMBCL représentent un sous-type moléculaire distinct associé à un mauvais résultat clinique

Introduction : Le test NanoString DLBCL90 récemment développé distingue de manière robuste le lymphome primaire médiastinal à grandes cellules B (PMBCL) du lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL), ainsi que les sous-types de cellules d’origine (COO) de DLBCL (ABC, GCB, non classé) et les cas présentant une signature Double-Hit (DHIT) (Ennishi D., JCO 2019). Lorsque ce test a été appliqué aux biopsies de 343 patients atteints de DLBCL de novo et traités uniformément par R-CHOP, dix-neuf de ces cas présentaient une signature moléculaire PMBCL (mPMBCL), malgré le fait qu’ils aient été diagnostiqués comme DLBCL sur la base de leur morphologie, de leur immunophénotype et de leurs caractéristiques cliniques. Ici, nous avons cherché à caractériser de manière exhaustive les caractéristiques moléculaires et clinicopathologiques de ces cas de mPMBCL.

Méthodes : Les estimations de survie ont été calculées à l’aide de l’analyse de Kaplan-Meier, en utilisant le temps jusqu’à la progression (TTP) et la survie spécifique à la maladie (DSS) comme critères d’évaluation. Nous avons appliqué le séquençage de l’exome entier, l’analyse du nombre de copies (SNP6.0) et la RNAseq pour identifier les mutations somatiques, les aberrations du nombre de copies et les gènes exprimés de manière différentielle, respectivement. La FISH a été appliquée pour évaluer la présence de réarrangements affectant MYC, BCL2 et BCL6. Nous avons utilisé les données précédemment obtenues au sein de notre centre à partir d’une cohorte de PMBCL (n=73) pour comparer les mPMBCL aux tumeurs PMBCL  » bona fide  » (Mottok et al, Blood 2019).

Résultats : L’âge médian au moment du diagnostic était significativement plus élevé pour les mPMBCL par rapport aux PMBCL (62 vs 37 ans, p<.001). Seuls 3 des 19 mPMBCL présentaient une masse médiastinale antérieure, une caractéristique clinique des PMBCL. Il est important de noter que ces cas présentaient une maladie extrathoracique étendue, ce qui est inhabituel pour les PMBCL. Un épanchement pleural et/ou péricardique a été observé dans seulement 11 % des cas de mPMBCL contre 50 % des cas de PMBCL (p<.001). Une atteinte de la moelle osseuse a été observée dans 21% des mPMBCL et n’a été observée dans aucun PMBCL (p<.001). Les mPMBCL ont eu tendance à avoir de moins bons résultats que les PMBCL traités par R-CHOP (n=61) (TTP à 2 ans : 62% vs 77%, log-rank p=.12 ; DSS : 74% vs 84%, p=.10). Selon l’attribution des COO du test DLBCL90, 16 des 19 mPMBCL ont été classés dans la catégorie GCB-DLBCL. Comparés aux autres GCB-DLBCL de notre cohorte DLBCL (à l’exclusion des cas positifs à la signature DHIT), les mPMBCL ont eu des résultats inférieurs (TTP à 2 ans : 62 % contre 87 %, log-rank p=.03 ; DSS : 72 % contre 89 %, p=.02). Il n’y avait pas de différences significatives dans les caractéristiques cliniques de base entre le mPMBCL et le GCB-DLBCL.

La comparaison du paysage mutationnel du mPMBCL et du PMBCL a démontré des perturbations dans les marques centrales de la pathogenèse du PMBCL : La signalisation JAK/STAT, l’activation de la voie NF-ĸB et l’évasion immunitaire. Les aberrations génomiques affectant la signalisation JAK-STAT étaient partagées entre les mPMBCL et les PMBCL, avec des SNV ou des indels affectant IL4R, STAT6 et SOCS1 trouvés dans 37 %, 37 % et 89 % des mPMBCL et 36 %, 40 % et 69 % des PMBCL, respectivement. En outre, l’analyse du nombre de copies a révélé des amplifications de JAK2 dans 44 % des mPMBCL (71 % des PMBCL) et l’analyse de l’expression génétique différentielle a montré des niveaux accrus de CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) et de gènes appartenant au réseau de signalisation JAK-STAT dans les mPMBCL. En revanche, ces aberrations génétiques ont été rarement observées dans une récente étude de séquençage de l’exome entier sur 304 tumeurs primaires de DLBCL (Chapuy B., Nat.Med. 2018). Des mutations ont également été observées dans les voies NF-ĸB mais les schémas de mutations étaient distincts entre les mPMBCL (BIRC3 et BTK) et les PMBCL (NKBIE), suggérant une biologie convergente avec des mécanismes alternatifs de dysrégulation des voies. De même, les mPMBCL hébergeaient différentes mutations (CD83) impliquées dans l’évasion immunitaire par rapport aux PMBCL (B2M).

Enfin, nous avons comparé le paysage mutationnel des mPMBCL avec des sous-groupes de DLBCL récemment décrits génétiquement. De manière intéressante, une grande majorité des mPMBCL hébergeait au moins une des mutations caractéristiques du « Cluster 4 » (incl. CD83, HIST1H1E, SGK1), un sous-ensemble de DLBCL défini par Chapuy et al qui inclut principalement les GCB-DLBCL.

Conclusion : Nous avons identifié et caractérisé un sous-groupe de DLBCL qui exprime la signature d’expression génétique PMBCL. Comme les PMBCL de bonne foi, ces tumeurs sont caractérisées par des aberrations génomiques qui affectent la signalisation JAK-STAT, NF-ĸB et la réponse immunitaire. Cependant, nos données suggèrent que la dysrégulation de ces deux dernières voies est établie par des modes évolutifs distincts qui se reflètent dans des schémas de mutation différentiels et des présentations anatomiques et cliniques. Nos résultats fournissent de nouvelles avenues thérapeutiques potentielles pour ce sous-ensemble de lymphomes.

Sarkozy:Takeda : Financement de la recherche. Savage:BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier et Seattle Genetics : Conseil, Honoraires ; Seattle Genetics, Inc : Consultance, Honoraires, Financement de la recherche. Scott : Celgene : Conseil ; Roche/Genentech : Financement de la recherche ; Janssen : Conseil, financement de la recherche ; NanoString : Brevets & Redevances : Inventeur nommé sur un brevet dont la licence a été accordée à NanoSting , Financement de la recherche. Steidl:Bristol-Myers Squibb : Financement de la recherche ; Nanostring : Brevets & Redevances : A déposé un brevet au nom de BC Cancer ; Juno Therapeutics : Consultance ; Tioma : Financement de la recherche ; Roche : Consultation ; Bayer : Consultance ; Seattle Genetics : Consultance.