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検体の種類に関わる性能、診断検査の限界
BVの診断検査には、大きく分けて臨床基準と検査ベースの検査があります。
最も広く認められている臨床基準は「Amselの基準」です（23）。 この臨床診断では、次の4つの基準のうち3つが満たされる必要がある：第1に、膣のpHがpH4.5より大きいこと；第2に、膣液中に手がかり細胞があること；第3に、乳白色で均質な膣分泌物；そして最後に、膣液に10％の水酸化カリウムを添加するとアミン（生臭さ）を放出することである（23）。 pHは、膣壁に貼るpHスティックを使って直接測定するか、pH4.0からpH6.5までの範囲でpH紙に触れる綿棒を使って測定することができる。 次に、綿棒を0.2mLの生理食塩水に抽出し、スライドグラスまたは試験管に入れ、その抽出液をスライドグラスに一滴垂らします。 10％水酸化カリウムを別のスライドグラスに滴下する。 綿棒を10%水酸化カリウムの中で攪拌し、直ちに生臭いにおいがするかどうかを評価する。 その後、両方の滴をカバースリップで覆い、光学顕微鏡で400倍の倍率で観察する。 膣上皮細胞に細菌が付着し、境界が見えなくなっているものを手がかり細胞として判定します。
検査室での検査では、未固定の膣塗抹標本を検査室に送り、標準的な方法でグラム染色を行うのが望ましい試料です。 染色されたスライドを読み取り、標準化された採点方法に基づいて形態型の数を評価する。 Spiegelら（24）が開発し、後にNugentら（25）が修正した診断基準は、よく再現された標準的なグラム染色採点法である（表（Table11））。
TABLE 1
Scoring system (0-10) for the Gram-?stained vaginal smears
| Score | Lactobacillus morphotypes | Gardnerella and Bacteroides species morphotypes | Curved Gram-variable rods | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 0 | 4+ | 0 | 0 | ||
| 1 | 3+ | 1+ | 1+ or 2+ | ||
| 2 | 2+ | 2+ | 3+ or 4+ | ||
| 3 | 1+ | 3+ | |||
| 4 | 0 | 4+ | 4 | 0 | 0 |
1+ ≦1/1000倍のフィールド。 2+ = 1-5/1000倍野; 3+ = 6-30/1000倍野; 4+ ≥ 30/1000倍野
Nugentら（25）による方法論では、スワブは側膣壁から得られ、スライドグラス上で転がされました。 その後、塗抹標本は熱固定され、対比染色としてサフラニンを用いてグラム染色された。 塗抹標本は，油浸法（倍率1000倍）で，大型グラム陽性桿菌（Lactobacillus morphotypes），小型グラム変量桿菌（G vaginalis morphotypes），小型グラム陰性桿菌（Bacteroides species morphotypes），曲面グラム変量桿菌（Mobiluncus species morphotypes）とグラム陽性球形虫（Gram-positive cocci）を判定した． グラム陽性球菌はスコアリングシステムの一部ではないが、かなりの数が存在する場合、報告する検査室もある。 グラム陽性球菌の数が増えても、正常な膣内細菌叢のパターンには含まれない。
0～3点は正常、4～6点は中間、7～10点はBVと定義されます。 中間の膣内細菌叢は臨床医に報告され、臨床状況に基づいた管理が行われます。 中程度のスコアの患者の32％がBVに、30％が正常な細菌叢に移行する。 多くの著者は、BVへの移行率が高いことを考慮し、中間のスコアを異常として含めるべきであると考えている。 再診するか治療するかは、BVに移行する臨床的リスクに基づいて決定される(26)。 このスコアリングシステムは臨床的疾患とよく相関している(18)。 臨床的手法は、ある種の緊急な臨床状況において即答できるため有用であるが、グラム染色法の方がより正確であると思われる（27-29）。 しかし、膜破裂を伴う妊娠では、陰性的中率（83％）は良いが感度が悪い（30）。
代替診断法も提案されているが、標準的なグラム染色法より優れているものは今のところない。 気液クロマトグラフィー、膣培養、液体調製パパニコロウ塗抹標本の使用は、サンプリングと実験室への共通輸送という実用的な利点から、代替診断法として提案されている。 本稿執筆時点では、これは研究の場でしか行われておらず、スミア読影のアプローチに大幅な変更が必要と思われる。 一般に感度は低いが、特異度はそれなりに高いという様々な報告がある(31,32)。 現在までのところ、核酸技術は複雑な微生物のアンバランスの臨床診断に有用であることは証明されていないが、将来的には有用であることが証明されるかもしれない(33)。 多くの研究者が、膣の複雑な微生物叢を評価するための遺伝的基盤を模索している。シャペロニン60に基づく評価の利用が予備的に期待されている一方、RNAに基づくアプローチを用いている研究者もいる。 これらの技術はいずれも複雑でコストがかかるため、現在のところ臨床の場では有用ではないが、将来的には非常に価値のあるものになる可能性がある（34,35）。 まとめると、現在最も有用な診断方法は、膣グラム染色である
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