PMC
Atypische lymfocyten zijn reactieve lymfocyten die bij een grote verscheidenheid van etiologieën voorkomen. Terwijl infecties zoals Epstein-Barr virus (EBV) en cytomegalovirus bekende oorzaken zijn van atypische lymfocyten in het perifere bloed, wijzen sporadische rapporten erop dat lymfocyten met atypische morfologie worden gezien bij patiënten die geïnfecteerd zijn met het recent opgedoken severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) , , , ]. Om de omvang en mogelijke betekenis van lymfocytaire atypie in verband met SARS-CoV-2 te onderzoeken, hebben we het spectrum van atypische lymfocytaire kenmerken beoordeeld in perifere uitstrijkjes van 33 SARS-CoV-2 patiënten van het Mount Sinai Hospital in New York City, het epicentrum van de pandemie in de Verenigde Staten.
De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met de institutionele IRB-protocollen. We bekeken de morfologie van lymfocyten in 33 uitstrijkjes van perifeer bloed die door medische technologen in het klinische hematologielaboratorium werden gemarkeerd voor beoordeling door een patholoog en vergeleken ze met een andere groep van 20 uitstrijkjes die werden gemarkeerd van niet-SARS-CoV-2 patiënten als controle. De SARS-CoV-2-cohortpatiënten werden positief voor de infectie bevestigd door middel van SARS-CoV-2-nucleïnezuurtests van keelswabmonsters met behulp van RT-PCR. Atypische lymfocytaire kenmerken werden geïdentificeerd, getabelleerd en vergeleken met hun aanwezigheid in perifere uitstrijkjes van het negatieve-controle cohort. Absolute lymfocytentellingen en morfologische kenmerken van de twee groepen werden vergeleken en geanalyseerd op statistische significantie bij 0,05 alfa door Student’s t-test met IBM SPSS Statistics Subscription (Armonk, NY, USA).
Zoals verwacht was 79 % (n = 26) van de SARS-CoV-2 patiënten lymfopenisch (<1,0 × 103 μL). Atypische lymfocytaire morfologie werd geïdentificeerd in 75 % (n = 25) als volgt: zestien vertoonden alleen plasmacytoïde kenmerken (Fig. 1, bovenste rij); vijf vertoonden EBV-achtige kenmerken (Downey II-achtige cellen) (Fig. 1, onderste rij), en vier vertoonden beide kenmerken. In totaal waren plasmacytoïde kenmerken aanwezig in uitstrijkjes van 20 patiënten, terwijl de Downey II-achtige cellen slechts bij negen aanwezig waren. Bij de niet-SARS-CoV-2-patiënten waren lymfocyten met plasmacytoïde morfologie afwezig, terwijl zes lymfocyten met Downey II-achtige celtypen vertoonden. De frequentie van plasmacytoïde lymfocyten bij SARS-CoV-2-patiënten was significant verschillend in vergelijking met niet- SARS-CoV-2-patiënten (p < .05; Student’s t-test). Van bijzonder belang bij SARS-CoV-2-patiënten was een associatie tussen Downey II-achtige celkenmerken en normale absolute lymfocytenaantallen (p < .05; Student’s t-test).
Bovenste rij: Atypische lymfocyten met plasmacytoïde kenmerken, waaronder kleine afmetingen, excentrische kern en donkerblauw cytoplasma. Onderste rij: Atypische lymfocyten met Downey II-achtige cellen met grote afmetingen, veel cytoplasma, ingesprongen kern en af en toe cytoplasmakorrels.
In dit beknopte verslag van de morfologie van lymfocyten in perifere uitstrijkjes van SARS-CoV-2-patiënten bevestigen we dat atypische lymfocyten vaak voorkomen in bloeduitstrijkjes van SARS-CoV-2-patiënten, zelfs in de setting van lymfopenie. Plasmacytoïde lymfocyten worden het vaakst aangetroffen en zijn sterk geassocieerd met SARS-CoV-2-infectie, althans in omgevingen met een hoge SARS-CoV-2-prevalentie, in dit geval New York City.
Atypische lymfocyten zijn een heterogene groep lymfocyten met variabele morfologische kenmerken die geassocieerd zijn met een polyklonale immuunrespons op antigene stimulatie. Het baanbrekende werk van McKinley en Downey in 1923, waarin zij de atypische lymfocyten categoriseerden die werden gezien bij infectieuze mononucleosis, was een van de eersten die dergelijke veranderingen in lymfocyten bestudeerden. Op basis van onze bevindingen kan de atypische lymfocytenmorfologie bij SARS-CoV-2 patiënten in twee hoofdcategorieën worden ingedeeld: 1. Plasmacytoïde kenmerken (Fig. 1, bovenste rij): dit zijn kleine rijpe lymfocyten met een excentrische kern en diepblauw cytoplasma; in deze categorie vallen ook cellen met plasmablastische kenmerken waarbij de cel iets groter is met open chromatine en prominente nucleolus; en 2. Downey II-achtige cellen (Fig. 1, onderste laag): grote lymfocyten die tegen de omringende rode bloedcellen aanliggen met overvloedig cytoplasma, en af en toe cytoplasmakorrels die qua morfologie lijken op de oorspronkelijke Downey II-cellen. Een perifeer uitstrijkje kan een van beide kenmerken of een spectrum van beide vertonen. Hoewel atypische lymfocytenmorfologie niet ongewoon is bij virale infecties in het algemeen, worden virussen die longontsteking veroorzaken, zoals influenza A, SARS-1 en Mexicaanse griep, niet vaak geassocieerd met atypische lymfocytenmorfologie. Enkele virale infecties worden geassocieerd met plasmacytoïde lymfocyten, waaronder knokkelkoorts en in mindere mate rodehond. Daarom wijzen de resultaten van deze studie op de unieke kenmerken van het SARS-CoV-2-virus die kunnen worden toegeschreven aan mechanismen van immuunreactie en ontregeling die niet vaak bij andere virussen worden gezien.
Onze resultaten komen overeen met rapporten uit verschillende landen die door de SARS-CoV-2-pandemie zijn getroffen, waarin atypische lymfocyten werden beschreven , , , ]. Door het uitvoeren van een systematische review met gedetailleerde morfologische beoordeling van de lymfocytenmorfologie, leveren wij echter bewijs voor de veranderingen die gezien kunnen worden bij SARS-CoV-2. Wij hebben aangetoond dat atypische lymfocytenmorfologie vaak voorkomt in het perifere bloed van SARS-CoV-2-patiënten. Meer bepaald worden atypische plasmacytoïde lymfocyten in hoge mate geassocieerd met SARS-CoV-2, wat ongebruikelijk is bij virale infecties. De klassieke Downey II-achtige cellen, die in het algemeen veel voorkomen bij virale infecties, worden minder vaak aangetroffen bij SARS-CoV-2-infectie.