Diffusa stora B-celliga lymfom med en molekylär PMBCL-uttryckssignatur representerar en distinkt molekylär subtyp som är förknippad med dåligt kliniskt utfall

Introduktion: Den nyligen utvecklade DLBCL90 NanoString-analysen skiljer robust primära mediastinala stora B-celliga lymfom (PMBCL) från diffusa stora B-celliga lymfom (DLBCL), liksom cell-of-origin (COO)-subtyper av DLBCL (ABC, GCB, oklassificerat) och fall med en Double-Hit (DHIT)-signatur (Ennishi D., JCO 2019). När denna analys tillämpades på biopsier från 343 patienter med de novo DLBCL som behandlades enhetligt med R-CHOP hade nitton av dessa fall en molekylär PMBCL-signatur (mPMBCL), trots att de diagnostiserades som DLBCL baserat på deras morfologi, immunfenotyp och kliniska egenskaper. Här syftade vi till att utförligt karakterisera de molekylära och klinikopatologiska egenskaperna hos dessa mPMBCL-fall.

Metoder: Överlevnadsskattningar beräknades med hjälp av Kaplan-Meier-analys, med tid till progression (TTP) och sjukdomsspecifik överlevnad (DSS) som endpoints. Vi tillämpade whole-exome-sekvensering, analys av kopieringsnummer (SNP6.0) och RNAseq för att identifiera somatiska mutationer, avvikelser i kopieringsnummer respektive differentiellt uttryckta gener. FISH tillämpades för att bedöma förekomsten av rearrangemang som påverkar MYC, BCL2 och BCL6. Vi använde data som tidigare erhållits inom vårt centrum från en PMBCL-kohort (n=73) för att jämföra mPMBCL med ”bona fide” PMBCL (PMBCL)-tumörer (Mottok et al, Blood 2019).

Resultat: Medianåldern vid diagnos var signifikant högre för mPMBCL jämfört med PMBCL (62 vs 37 år, p<.001). Endast 3 av 19 mPMBCL presenterade en främre mediastinal massa, ett kliniskt kännetecken för PMBCL. Viktigt är att dessa fall uppvisade omfattande extrathoraxsjukdom, vilket är ovanligt för PMBCL. Pleura- och/eller perikardutgjutning sågs i endast 11 % av mPMBCL jämfört med 50 % av PMBCL (p<.001). Benmärgspåverkan sågs hos 21 % av mPMBCL och observerades inte hos någon PMBCL (p<.001). De mPMBCL hade en tendens till sämre resultat jämfört med R-CHOP-behandlade PMBCL (n=61) (2 års TTP: 62 % vs 77 %, log-rank p=.12; DSS: 74 % vs 84 %, p=.10). Genom COO-tilldelning av DLBCL90-analysen kategoriserades 16 av 19 mPMBCL som GCB-DLBCL. Jämfört med övriga GCB-DLBCL i vår DLBCL-kohort (exklusive DHIT-signaturpositiva fall) hade mPMBCL sämre utfall (2-års TTP: 62 % vs 87 %, log-rank p=.03; DSS: 72 % vs 89 %, p=.02). Det fanns inga signifikanta skillnader i kliniska baseline-egenskaper mellan mPMBCL och GCB-DLBCL.

En jämförelse av mPMBCL:s och PMBCL:s mutationslandskap visade på störningar i de centrala kännetecknen för PMBCL:s patogenes: JAK/STAT-signalering, aktivering av NF-ĸB-vägen och immunförsvar. Genomiska aberrationer som påverkade JAK-STAT-signalering var gemensamma för mPMBCL och PMBCL, med SNVs eller indels som påverkade IL4R, STAT6 och SOCS1 som hittades i 37 %, 37 % och 89 % av mPMBCL och 36 %, 40 % och 69 % av PMBCL, respektive. Dessutom visade analys av antalet kopior att JAK2-amplifieringar fanns i 44 % av mPMBCL (71 % av PMBCL) och differentiell genuttrycksanalys visade ökade nivåer av CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) och gener som tillhör JAK-STAT-signalenätverket i mPMBCL. Däremot observerades dessa genetiska avvikelser sällan i en nyligen genomförd helexomsekvenseringsstudie av 304 primära DLBCL-tumörer (Chapuy B., Nat.Med. 2018). Mutationer observerades också i NF-ĸB-vägar men mönstren av mutationer var distinkta mellan mPMBCL (BIRC3 och BTK) och PMBCL (NKBIE) vilket tyder på konvergent biologi med alternativa mekanismer för dysreglering av vägarna. På samma sätt hade mPMBCL olika mutationer (CD83) som var involverade i immunförsvaret jämfört med PMBCL (B2M).

Slutligt jämförde vi mPMBCL:s mutationslandskap med nyligen beskrivna genetiskt definierade undergrupper av DLBCL. Intressant nog hade en stor majoritet av mPMBCL minst en av de mutationer som är karakteristiska för ”Cluster 4” (inkl. CD83, HIST1H1E, SGK1), en undergrupp av DLBCL som definierats av Chapuy et al och som till övervägande del omfattar GCB-DLBCL.

Slutsats: Vi har identifierat och karakteriserat en undergrupp av DLBCL som uttrycker PMBCLs genuttryckssignatur. I likhet med bona fide PMBCL kännetecknas dessa tumörer av genomiska aberrationer som påverkar JAK-STAT, NF-ĸB-signalering och immunsvar. Våra data tyder dock på att dysreglering av de två sistnämnda vägarna etableras genom olika evolutionära modus som återspeglas i differentiella mutationsmönster och anatomiska och kliniska presentationer. Våra resultat ger potentiella nya terapeutiska vägar för denna undergrupp av lymfom.

Sarkozy:Takeda: Forskningsfinansiering:: Takeda: Takeda: Takeda: Forskningsfinansiering. Savage: BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier och Seattle Genetics: Seattle Genetics, Inc.: Konsulttjänster, arvoden; Seattle Genetics, Inc: Konsulttjänster, arvoden, forskningsfinansiering. Scott: Celgene: Konsultverksamhet; Roche/Genentech: Forskningsfinansiering; Janssen: Konsult, forskningsfinansiering; NanoString: Patent & Royalty: Upphovsmän på ett patent som licensierats till NanoSting , Forskningsfinansiering:: Företrädesvis upphovsman på ett patent som licensierats till NanoSting . Steidl:Bristol-Myers Squibb: Forskningsfinansiering; Nanostring: Patent & Royalty: Patent inlämnat på uppdrag av BC Cancer; Juno Therapeutics: Konsulttjänster; Tioma: Forskningsfinansiering; Roche: Rådgivning; Bayer: Seattle Genetics: Konsulttjänster: Konsult: Geneve: Konsult: Geneve: Konsult: Konsult.