PMC
Prestationer relaterade till provtyp och diagnostiska testbegränsningar
Det finns två huvudkategorier av diagnostiska tester för bakteriell vaginos: kliniska kriterier och laboratoriebaserade tester.
De mest allmänt accepterade kliniska kriterierna är ”Amsels kriterier” (23). Denna kliniska diagnos kräver att tre av följande fyra kriterier uppfylls: för det första, ett vaginalt pH som är högre än pH 4,5, för det andra, förekomst av klubbceller i vaginalvätskan, för det tredje, ett mjölkaktigt, homogent vaginalutflöde och slutligen, avgivning av en amin- (fisk-) lukt efter tillsats av 10 % kaliumhydroxid till vaginalvätskan (23). pH kan bestämmas direkt med hjälp av pH-stickor som placeras på vaginalväggen eller med hjälp av en svabb som berörs på pH-papper i intervallet som täcker pH 4,0 till pH 6,5. Svabben extraheras sedan i 0,2 ml fysiologisk koksaltlösning antingen på ett glasobjektsglas eller i ett provrör; en droppe av extraktet placeras sedan på ett glasobjektsglas. En droppe 10 % kaliumhydroxid placeras på ett annat objektglas. Svabben rörs sedan om i den 10-procentiga kaliumhydroxiden och utvärderas omedelbart för att se om det finns en fisklukt. Båda dropparna täcks sedan med ett täckglas och undersöks i ljusmikroskop med 400x förstoring. Spårceller identifieras som vaginala epitelceller med en så kraftig beläggning av bakterier att de perifera gränserna döljs. Om tre av fyra kriterier är uppfyllda kan en klinisk diagnos av BV ställas.
För laboratorietestmetoden är det föredragna provet ett ofixerat vaginalt utstryk som skickas till laboratoriet för gramfärgning med standardmetoder. Det färgade preparatet avläses och antalet morfotyper utvärderas utifrån en standardiserad poängsättningsmetod. De diagnostiska kriterier som utvecklats av Spiegel et al (24) och senare modifierats av Nugent et al (25) har varit en välreproducerad standardiserad poängsättningsmetod för gramfärgning (tabell (tabell11)).
TABELL 1
Scoresystem (0-10) för Gram-stained vaginal smears
| Score | Lactobacillus morphotypes | Gardnerella and Bacteroides species morphotypes | Curved Gram-variable rods |
|---|---|---|---|
| 0 | 4+ | 0 | 0 |
| 1 | 3+ | 1+ | 1+ or 2+ |
| 2 | 2+ | 2+ | 3+ or 4+ |
| 3 | 1+ | 3+ | |
| 4 | 0 | 4+ |
1+ ≤ 1/1000x fält; 2+ = 1-5/1000x fält; 3+ = 6-30/1000x fält; 4+ ≥ 30/1000x fält
I metoden av Nugent et al (25) erhölls svabben från den laterala vaginala väggen och rullades på ett glasobjektiv. Utstrykningarna värmebefästes sedan och gramfärgades med safranin som motfärgning. Utstryket utvärderades sedan för följande morfotyper under oljeimpregnering (1000x förstoring): stora Gram-positiva stavar (Lactobacillus-morfotyper), små Gram-variabla stavar (G vaginalis-morfotyper), små Gram-negativa stavar (Bacteroides species-morfotyper), böjda Gram-variabla stavar (Mobiluncus species-morfotyper) och Gram-positiva kokker. Även om grampositiva kokker inte ingår i poängsystemet rapporterar vissa laboratorier dem om de förekommer i betydande antal. Ett ökat antal Gram-positiva kokker ingår inte i mönstret för den normala vaginalfloran. Noterbart är att Nugents poängsättningssystem gav en förbättring av överensstämmelsen mellan centrumen jämfört med de tidigare publicerade kriterierna (24), men en standardiserad poängsättningsmetod är det viktigaste tillvägagångssättet.
En poängsättning på noll till tre anses vara normal, fyra till sex anses vara intermediär, och sju till tio definieras som BV. Intermediär vaginalflora rapporteras till klinikern för hantering utifrån det kliniska sammanhanget. Trettiotvå procent av patienterna med en intermediär poäng kommer att övergå till BV och 30 procent till normal flora. Många författare anser att en intermediär poängsättning bör inkluderas som onormal med tanke på den höga andelen som övergår till BV. Beslutet om förnyad kontroll eller behandling baseras på den kliniska risken för att övergå till BV (26). Detta poängsystem korrelerar väl med den kliniska sjukdomen (18). Den kliniska metoden är användbar eftersom den möjliggör ett omedelbart svar i vissa brådskande kliniska situationer, men Gramfärgningsmetoden verkar vara mer exakt (27-29). Vid graviditet i samband med membranruptur har den dock ett bra negativt prediktivt värde (83 %) men dålig känslighet (30).
Det har föreslagits alternativa diagnostiska metoder, men ingen av dem är för närvarande bättre än den standardiserade Gram stain-metoden. Användning av gas-vätskekromatografi, vaginala kulturer och Papanicolaou-utstryk med flytande preparat har föreslagits som alternativa diagnosmetoder på grund av den praktiska fördelen med provtagning och gemensam transport till laboratoriet. I skrivande stund har detta endast gjorts i forskningsmiljöer och skulle kräva betydande förändringar i tillvägagångssättet för att läsa utstryken. Det finns varierande rapporter om en allmän brist på sensitivitet men en rimlig specificitet (31,32). Hittills har nukleinsyretekniker inte visat sig vara användbara för den kliniska diagnosen av den komplexa mikrobiella obalansen, men kan visa sig användbara i framtiden (33). Många forskare utforskar en genetisk grund för utvärdering av den komplexa mikrobiella floran i vagina; det finns ett preliminärt löfte om att använda chaperonin 60-baserade utvärderingar, medan andra använder en RNA-baserad metod. Ingen av dessa tekniker är för närvarande användbara i klinisk miljö på grund av komplexitet och kostnad, men de kan vara mycket värdefulla i framtiden (34,35). Sammanfattningsvis är den mest användbara nuvarande diagnostiska metoden den vaginala gramfärgningen.