Difuzní velkobuněčné B-lymfomy s molekulárním expresním znakem PMBCL představují odlišný molekulární podtyp spojený s horším klinickým výsledkem

admin

Úvod: Nedávno vyvinutý test DLBCL90 NanoString robustně rozlišuje primární mediastinální velkobuněčný B-lymfom (PMBCL) od difuzního velkobuněčného B-lymfomu (DLBCL), stejně jako podtypy DLBCL podle původu buňky (ABC, GCB, neklasifikovaný) a případy s podpisem Double-Hit (DHIT) (Ennishi D., JCO 2019). Když byl tento test aplikován na biopsie 343 pacientů s de novo DLBCL jednotně léčených R-CHOP, devatenáct z těchto případů mělo molekulární signaturu PMBCL (mPMBCL), přestože byly na základě morfologie, imunofenotypu a klinického obrazu diagnostikovány jako DLBCL. Zde jsme se zaměřili na komplexní charakterizaci molekulárních a klinicko-patologických rysů těchto případů mPMBCL.

Metody: Odhady přežití byly vypočteny pomocí Kaplanovy-Meierovy analýzy s použitím doby do progrese (TTP) a přežití specifického pro onemocnění (DSS) jako koncových ukazatelů. K identifikaci somatických mutací, aberací v počtu kopií a diferenciálně exprimovaných genů jsme použili celoexomové sekvenování, analýzu počtu kopií (SNP6.0) a RNAseq. FISH byla použita k posouzení přítomnosti přestaveb ovlivňujících MYC, BCL2 a BCL6. K porovnání mPMBCL s nádory „bona fide“ PMBCL (PMBCL) jsme použili data dříve získaná v rámci našeho centra z kohorty PMBCL (n=73) (Mottok et al, Blood 2019).

Výsledky: Medián věku v době diagnózy byl u mPMBCL ve srovnání s PMBCL významně vyšší (62 vs 37 let, p<.001). Pouze u 3 z 19 mPMBCL byla přítomna přední mediastinální masa, což je klinický znak PMBCL. Důležité je, že tyto případy vykazovaly rozsáhlé extrathorakální onemocnění, což je u PMBCL neobvyklé. Pleurální a/nebo perikardiální výpotek byl pozorován pouze u 11 % mPMBCL ve srovnání s 50 % PMBCL (p<.001). Postižení kostní dřeně bylo pozorováno u 21 % mPMBCL a nebylo pozorováno u žádné PMBCL (p<.001). U mPMBCL byl zaznamenán trend k horším výsledkům ve srovnání s PMBCL léčenými R-CHOP (n=61) (2letý TTP: 62 % vs 77 %, log-rank p=,12; DSS: 74 % vs 84 %, p=,10). Podle přiřazení COO testu DLBCL90 bylo 16 z 19 mPMBCL zařazeno do kategorie GCB-DLBCL. Ve srovnání s ostatními GCB-DLBCL v naší kohortě DLBCL (s výjimkou případů s pozitivním DHIT podpisem) měly mPMBCL horší výsledky (2letý TTP: 62 % vs 87 %, log-rank p=,03; DSS: 72 % vs 89 %, p=,02). Mezi mPMBCL a GCB-DLBCL nebyly zjištěny žádné významné rozdíly v základních klinických charakteristikách.

Srovnání mutačního prostředí mPMBCL s PMBCL prokázalo poruchy v hlavních charakteristikách patogeneze PMBCL: Jak/STAT signalizace, aktivace dráhy NF-ĸB a vyhýbání se imunitnímu systému. Genomové aberace ovlivňující signalizaci JAK-STAT byly společné pro mPMBCL a PMBCL, přičemž SNV nebo indely ovlivňující IL4R, STAT6 a SOCS1 byly nalezeny u 37 %, 37 % a 89 % mPMBCL a 36 %, 40 % a 69 % PMBCL. Analýza počtu kopií navíc odhalila amplifikace JAK2 u 44 % mPMBCL (71 % PMBCL) a analýza diferenciální genové exprese ukázala u mPMBCL zvýšené hladiny CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) a genů patřících do signální sítě JAK-STAT. Naproti tomu v nedávné studii celoexomového sekvenování u 304 primárních nádorů DLBCL byly tyto genetické aberace pozorovány jen zřídka (Chapuy B., Nat.Med. 2018). Mutace byly pozorovány také v drahách NF-ĸB, ale vzorce mutací se lišily mezi mPMBCL (BIRC3 a BTK) a PMBCL (NKBIE), což naznačuje konvergentní biologii s alternativními mechanismy dysregulace drah. Podobně se u mPMBCL vyskytovaly jiné mutace (CD83), které se podílejí na vyhýbání se imunitnímu systému, než u PMBCL (B2M).

Nakonec jsme porovnali mutační krajinu mPMBCL s nedávno popsanými geneticky definovanými podskupinami DLBCL. Je zajímavé, že velká většina mPMBCL nesla alespoň jednu z mutací charakteristických pro „klastr 4“ (vč. CD83, HIST1H1E, SGK1), podskupinu DLBCL definovanou Chapuyem et al, která zahrnuje převážně GCB-DLBCL.

Závěr: Identifikovali jsme a charakterizovali podskupinu DLBCL, která exprimuje genový expresní podpis PMBCL. Podobně jako u bona fide PMBCL se tyto nádory vyznačují genomickými aberacemi, které ovlivňují signalizaci JAK-STAT, NF-ĸB a imunitní odpověď. Naše údaje však naznačují, že dysregulace dvou posledně jmenovaných drah vzniká odlišnými evolučními způsoby, které se odrážejí v rozdílných mutačních vzorcích a anatomických a klinických prezentacích. Naše zjištění poskytují potenciální nové terapeutické možnosti pro tuto podskupinu lymfomů.

Zveřejněné informace

Sarkozy: Takeda: Financování výzkumu. Savage: BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier a Seattle Genetics: Seattle Genetics, Inc.: konzultace, honoráře: Seattle Inc.: konzultace, honoráře, financování výzkumu. Scott: Celgene: Celgene: poradenství; Roche/Genentech: poradenství; Roche/Genentech: poradenství; Roche/Genentech: poradenství: Financování výzkumu; Janssen: Jansen: konzultace, financování výzkumu; NanoString: konzultace, financování výzkumu: Patenty & Autorské honoráře: Jmenovitý vynálezce patentu licencovaného společnosti NanoSting , Financování výzkumu. Steidl:Bristol-Myers Squibb: Financování výzkumu; Nanostring: Patenty & Autorské honoráře: Podaný patent jménem společnosti BC Cancer; Juno Therapeutics: Konzultace; Tioma: Financování výzkumu; Roche: Konzultace; Bayer: Konzultace; Seattle Genetics:

: Konzultace.