PMC

Výkon v závislosti na typu vzorku a omezení diagnostických testů

Existují dvě hlavní kategorie diagnostických testů BV: klinická kritéria a laboratorní testy.

Nejrozšířenější klinická kritéria jsou „Amselova kritéria“ (23). Tato klinická diagnóza vyžaduje splnění tří z následujících čtyř kritérií: zaprvé vaginální pH vyšší než pH 4,5; zadruhé přítomnost stopových buněk ve vaginální tekutině; zatřetí mléčný, homogenní vaginální výtok; a konečně uvolnění aminového (rybího) zápachu po přidání 10% hydroxidu draselného do vaginální tekutiny (23). pH lze stanovit přímo pomocí pH tyčinek přiložených na poševní stěnu nebo pomocí tamponu, který se dotýká pH papíru v rozmezí zahrnujícím pH 4,0 až pH 6,5. V případě, že je pH vyšší než pH 6,5, lze pH stanovit přímo pomocí pH tyčinek přiložených na poševní stěnu. Tampon se poté extrahuje do 0,2 ml fyziologického roztoku buď na sklíčko, nebo do zkumavky; kapka extraktu se poté umístí na sklíčko. Na další sklíčko se umístí kapka 10% hydroxidu draselného. Poté se tampon promíchá v 10% hydroxidu draselném a ihned se vyhodnotí přítomnost rybího zápachu. Obě kapky se poté zakryjí krycím sklíčkem a zkoumají se světelným mikroskopem při 400násobném zvětšení. Klíčové buňky jsou identifikovány jako vaginální epiteliální buňky s tak silným povlakem bakterií, že jsou zastřeny periferní hranice. Pokud jsou splněna tři ze čtyř kritérií, lze stanovit klinickou diagnózu BV.

Pro laboratorní metodu vyšetření se upřednostňuje vzorek nefixovaného vaginálního stěru zaslaný do laboratoře k obarvení podle Grama standardními metodami. Obarvený preparát se odečte a na základě standardizované skórovací metody se vyhodnotí počet morfotypů. Diagnostická kritéria vyvinutá Spiegelem et al (24) a později modifikovaná Nugentem et al (25) byla dobře reprodukovanou standardizovanou metodou skórování při barvení podle Grama (tabulka (Tabulka11).

V metodice Nugenta et al (25) byl stěr získán z laterální stěny pochvy a navinut na skleněné sklíčko. Stěry byly poté tepelně fixovány a obarveny podle Grama s použitím safraninu jako kontrabarviva. Stěr byl poté v olejové imerzi (zvětšení 1000x) hodnocen na následující morfotypy: velké grampozitivní tyčinky (morfotypy Lactobacillus), malé gramvarietní tyčinky (morfotypy G vaginalis), malé gramnegativní tyčinky (morfotypy Bacteroides species), zahnuté gramvarietní tyčinky (morfotypy Mobiluncus species) a grampozitivní koky. Ačkoli grampozitivní koky nejsou součástí skórovacího systému, některé laboratoře je uvádějí, pokud jsou přítomny ve významném počtu. Zvýšený počet grampozitivních koků není součástí normální vaginální flóry. Za zmínku stojí, že Nugentův skórovací systém přinesl zlepšení shody mezi centry ve srovnání s dříve publikovanými kritérii (24), ale nejdůležitější je standardizovaná metoda skórování.

Skóre nula až tři je považováno za normální, čtyři až šest za střední a sedm až deset za BV. Středně pokročilá vaginální flóra je na základě klinického kontextu hlášena klinickému lékaři k řešení. Třicet dva procent pacientek se středním skóre přejde na BV a 30 % na normální flóru. Mnozí autoři se domnívají, že střední skóre by mělo být zahrnuto jako abnormální vzhledem k vysoké míře přechodu do BV. Rozhodnutí o překontrolování nebo léčbě je založeno na klinickém riziku přechodu do BV (26). Tento skórovací systém dobře koreluje s klinickým onemocněním (18). Klinická metodika je užitečná, protože umožňuje okamžitou odpověď v určitých naléhavých klinických situacích, ale metoda barvení podle Grama se zdá být přesnější (27-29). V těhotenství při ruptuře membrán má však dobrou negativní prediktivní hodnotu (83 %), ale nízkou senzitivitu (30).

Byly navrženy alternativní diagnostické metody, ale žádná není v současné době lepší než standardizovaná metodika barvení podle Grama. Jako alternativní metody diagnostiky bylo navrženo použití plynově-kapalinové chromatografie, vaginálních kultur a tekutých preparátů Papanicolaouových stěrů vzhledem k praktické výhodě odběru vzorků a společnému transportu do laboratoře. V době psaní tohoto článku byla tato metoda prováděna pouze ve výzkumných zařízeních a vyžadovala by významné změny v přístupu k odečítání stěrů. Existují různé zprávy o obecně nedostatečné citlivosti, ale přiměřené specifičnosti (31,32). Techniky nukleových kyselin se doposud neukázaly jako užitečné pro klinickou diagnostiku komplexní mikrobiální nerovnováhy, ale v budoucnu se mohou ukázat jako užitečné (33). Mnoho výzkumníků zkoumá genetický základ pro hodnocení komplexní mikrobiální flóry pochvy; předběžně slibné je využití hodnocení na základě chaperoninu 60, zatímco jiní používají přístup založený na RNA. Žádná z těchto technik není v současné době použitelná v klinickém prostředí kvůli složitosti a nákladům, ale v budoucnu mohou být velmi cenné (34,35). Souhrnně lze říci, že nejužitečnější současnou diagnostickou metodou je vaginální barvení podle Grama.