Chłoniaki rozlane z dużych komórek B z molekularną sygnaturą ekspresji PMBCL reprezentują odrębny podtyp molekularny związany z gorszym wynikiem klinicznym

Wprowadzenie: Niedawno opracowany test DLBCL90 NanoString solidnie odróżnia pierwotnego chłoniaka śródpiersia z dużych komórek B (PMBCL) od chłoniaka rozlanego z dużych komórek B (DLBCL), jak również podtypy pochodzenia komórkowego (COO) DLBCL (ABC, GCB, niesklasyfikowane) i przypadki z sygnaturą Double-Hit (DHIT) (Ennishi D., JCO 2019). Kiedy test ten zastosowano do biopsji od 343 pacjentów z de novo DLBCL jednolicie leczonych R-CHOP, dziewiętnaście z tych przypadków miało molekularną sygnaturę PMBCL (mPMBCL), pomimo faktu, że zostały one zdiagnozowane jako DLBCL na podstawie morfologii, immunofenotypu i cech klinicznych. Celem niniejszej pracy była kompleksowa charakterystyka molekularnych i kliniczno-patologicznych cech tych przypadków mPMBCL.

Metody: Oceny przeżycia obliczono za pomocą analizy Kaplana-Meiera, używając czasu do progresji (TTP) i przeżycia specyficznego dla choroby (DSS) jako punktów końcowych. Zastosowano sekwencjonowanie całego eksomu, analizę liczby kopii (SNP6.0) i RNAseq w celu identyfikacji mutacji somatycznych, aberracji liczby kopii i genów ulegających różnej ekspresji. W celu oceny obecności rearanżacji dotyczących MYC, BCL2 i BCL6 zastosowano technikę FISH. Wykorzystaliśmy dane uzyskane wcześniej w naszym ośrodku z kohorty PMBCL (n=73) w celu porównania mPMBCL z guzami „bona fide” PMBCL (Mottok et al, Blood 2019).

Wyniki: Mediana wieku w momencie rozpoznania była istotnie wyższa dla mPMBCL w porównaniu z PMBCL (62 vs 37 lat, p<.001). Tylko 3 z 19 przypadków mPMBCL charakteryzowały się obecnością masy w przednim śródpiersiu, co jest charakterystyczne dla PMBCL. Co ważne, w tych przypadkach obserwowano rozległą chorobę pozawłośniczkową, co jest nietypowe dla PMBCL. Wysięk opłucnowy i/lub osierdziowy obserwowano tylko w 11% przypadków mPMBCL w porównaniu z 50% przypadków PMBCL (p<.001). Zajęcie szpiku kostnego obserwowano w 21% mPMBCL i nie obserwowano go w żadnym PMBCL (p<.001). Wyniki leczenia mPMBCL były gorsze w porównaniu z PMBCL leczonymi R-CHOP (n=61) (2-letni TTP: 62% vs 77%, log-rank p=,12; DSS: 74% vs 84%, p=,10). Na podstawie przypisania COO w teście DLBCL90, 16 z 19 mPMBCL zakwalifikowano do kategorii GCB-DLBCL. W porównaniu z pozostałymi GCB-DLBCL w naszej kohorcie DLBCL (wyłączając przypadki DHIT-signature-positive), mPMBCL miały gorsze wyniki leczenia (2-letni TTP: 62% vs 87%, log-rank p=.03; DSS: 72% vs 89%, p=.02). Nie stwierdzono istotnych różnic w wyjściowej charakterystyce klinicznej między mPMBCL i GCB-DLBCL.

Porównanie krajobrazu mutacyjnego mPMBCL i PMBCL wykazało zaburzenia w centralnych cechach patogenezy PMBCL: sygnalizacji JAK/STAT, aktywacji szlaku NF-ĸB i unikania odpowiedzi immunologicznej. Aberracje genomowe wpływające na sygnalizację JAK-STAT były wspólne dla mPMBCL i PMBCL, z SNV lub indelami wpływającymi na IL4R, STAT6 i SOCS1 występującymi odpowiednio w 37%, 37% i 89% mPMBCL oraz 36%, 40% i 69% PMBCL. Ponadto analiza liczby kopii wykazała amplifikację JAK2 w 44% mPMBCL (71% PMBCL), a analiza różnicowej ekspresji genów wykazała zwiększony poziom CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) i genów należących do sieci sygnałowej JAK-STAT w mPMBCL. W przeciwieństwie do tego, te aberracje genetyczne były rzadko obserwowane w niedawnym badaniu sekwencjonowania whole-exome na 304 pierwotnych guzach DLBCL (Chapuy B., Nat.Med. 2018). Mutacje obserwowano również w szlakach NF-ĸB, ale wzory mutacji były odmienne pomiędzy mPMBCL (BIRC3 i BTK) i PMBCL (NKBIE) sugerując konwergentną biologię z alternatywnymi mechanizmami dysregulacji szlaków. Podobnie w mPMBCL występowały inne mutacje (CD83) związane z unikaniem odpowiedzi immunologicznej niż w PMBCL (B2M).

Na koniec porównaliśmy krajobraz mutacyjny mPMBCL z ostatnio opisanymi genetycznie zdefiniowanymi podgrupami DLBCL. Co ciekawe, znaczna większość mPMBCL była nosicielami przynajmniej jednej z mutacji charakterystycznych dla „Cluster 4” (m.in. CD83, HIST1H1E, SGK1), podgrupy DLBCL zdefiniowanej przez Chapuy i wsp. i obejmującej głównie GCB-DLBCL.

Wniosek: Zidentyfikowaliśmy i scharakteryzowaliśmy podgrupę DLBCL, która wykazuje ekspresję genów charakterystyczną dla PMBCL. Podobnie jak w przypadku PMBCL, guzy te charakteryzują się aberracjami genomowymi, które wpływają na sygnalizację JAK-STAT, NF-ĸB i odpowiedź immunologiczną. Jednakże nasze dane sugerują, że dysregulacja tych dwóch ostatnich szlaków jest ustalona przez odmienne tryby ewolucji, które znajdują odzwierciedlenie w różnych wzorcach mutacji oraz anatomicznych i klinicznych prezentacjach. Nasze odkrycia zapewniają potencjalne nowe możliwości terapeutyczne dla tej podgrupy chłoniaków.

Sarkozy:Takeda: Finansowanie badań. Savage:BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier i Seattle Genetics: Konsultacje, honoraria; Seattle Genetics, Inc: Konsultacje, Honoraria, Finansowanie badań. Scott:Celgene: Konsultacje; Roche/Genentech: Finansowanie badań; Janssen: Konsultacje, Finansowanie badań; NanoString: Patenty & Tantiemy: Named inventor on a patent licensed to NanoSting , Research Funding. Steidl:Bristol-Myers Squibb: Research Funding; Nanostring: Patenty & Tantiemy: Zgłoszony patent w imieniu BC Cancer; Juno Therapeutics: Konsultacje; Tioma: Finansowanie badań; Roche: Konsultacje; Bayer: Konsultacje; Seattle Genetics: Doradztwo.