PMC

Wydajność w zależności od rodzaju próbki i ograniczenia testów diagnostycznych

Istnieją dwie główne kategorie testów diagnostycznych BV: kryteria kliniczne i testy laboratoryjne.

Najszerzej akceptowane kryteria kliniczne to „kryteria Amsela” (23). Ta kliniczna diagnoza wymaga spełnienia trzech z czterech następujących kryteriów: po pierwsze, pH pochwy większe niż pH 4,5; po drugie, obecność komórek glejowych w płynie pochwowym; po trzecie, mleczna, jednorodna wydzielina pochwowa; i wreszcie, uwolnienie aminowego (rybiego) zapachu po dodaniu 10% wodorotlenku potasu do płynu pochwowego (23). pH można określić bezpośrednio za pomocą pałeczek pH umieszczonych na ścianie pochwy lub za pomocą wacika, który jest dotykany na papierze pH w zakresie od pH 4,0 do pH 6,5. Wymaz jest następnie ekstrahowany do 0,2 mL soli fizjologicznej na szkiełku szklanym lub w probówce; kropla ekstraktu jest następnie umieszczana na szkiełku szklanym. Na innym szkiełku szklanym umieszcza się kroplę 10% wodorotlenku potasu. Wymazówkę miesza się w 10% wodorotlenku potasu i natychmiast ocenia na obecność rybiego zapachu. Obie krople są następnie przykrywane szkiełkiem nakrywkowym i badane pod mikroskopem świetlnym w powiększeniu 400x. Komórki orientacyjne są identyfikowane jako komórki nabłonka pochwy z tak silnym nalotem bakteryjnym, że granice obwodowe są przesłonięte. Jeśli spełnione są trzy z czterech kryteriów, można postawić kliniczne rozpoznanie BV.

W przypadku badań laboratoryjnych preferowaną próbką jest nieutrwalony wymaz z pochwy wysłany do laboratorium w celu wybarwienia metodą Grama przy użyciu standardowych metod. Wybarwiony preparat jest odczytywany, a liczba morfotypów jest oceniana na podstawie standardowej metody punktowej. Kryteria diagnostyczne opracowane przez Spiegel i wsp. (24), a następnie zmodyfikowane przez Nugent i wsp. (25) są dobrze znaną, standaryzowaną metodą punktacji metodą Grama (Tabela 11).

W metodyce Nugenta i wsp. (25) wymaz uzyskiwano z bocznej ściany pochwy i wałkowano na szkiełku szklanym. Wymazy były następnie utrwalane termicznie i barwione metodą Grama z użyciem safraniny jako kontrbarwnika. Wymaz oceniano następnie w immersji olejowej (powiększenie 1000x) pod kątem występowania następujących morfotypów: duże prątki Gram-dodatnie (morfotypy Lactobacillus), małe prątki Gram-ujemne (morfotypy G vaginalis), małe prątki Gram-ujemne (morfotypy Bacteroides species), zakrzywione prątki Gram-ujemne (morfotypy Mobiluncus species) oraz Gram-dodatnie koki. Chociaż kokcyty Gram-dodatnie nie są częścią systemu punktacji, niektóre laboratoria zgłaszają je, jeśli występują w znacznej liczbie. Zwiększona liczba pałeczek Gram-dodatnich nie należy do wzorca prawidłowej flory pochwy. Należy zauważyć, że system punktacji Nugenta przyniósł poprawę zgodności między ośrodkami w porównaniu z wcześniej opublikowanymi kryteriami (24), ale najważniejsza jest standaryzowana metoda punktacji.

Punktacja od zera do trzech jest uważana za prawidłową, od czterech do sześciu za pośrednią, a od siedmiu do dziesięciu za BV. Pośrednia flora pochwy jest zgłaszana do klinicysty w celu zarządzania w oparciu o kontekst kliniczny. Trzydzieści dwa procent pacjentek z wynikiem pośrednim przejdzie do BV, a 30% do flory prawidłowej. Wielu autorów uważa, że wynik pośredni powinien być traktowany jako nieprawidłowy, biorąc pod uwagę wysoki odsetek przejścia do BV. Decyzja o ponownej kontroli lub leczeniu jest oparta na klinicznym ryzyku przejścia do BV (26). Ten system punktacji dobrze koreluje z chorobą kliniczną (18). Metodologia kliniczna jest przydatna, ponieważ pozwala na natychmiastową odpowiedź w niektórych pilnych sytuacjach klinicznych, ale metoda barwienia metodą Grama wydaje się być bardziej dokładna (27-29). Jednak w przypadku ciąży z pęknięciem błon płodowych ma ona dobrą ujemną wartość predykcyjną (83%), ale słabą czułość (30).

Zaproponowano alternatywne metody diagnostyczne, ale żadna z nich nie jest obecnie lepsza od standaryzowanej metodyki Grama. Zastosowanie chromatografii gazowo-cieczowej, posiewów z pochwy i płynnych preparatów rozmazów Papanicolaou zostało zaproponowane jako alternatywne metody diagnostyczne ze względu na praktyczną zaletę pobierania próbek i wspólnego transportu do laboratorium. W momencie pisania tego tekstu, zostało to przeprowadzone jedynie w warunkach badawczych i wymagałoby znaczących zmian w podejściu do odczytu rozmazów. Istnieją różne doniesienia o ogólnym braku czułości, ale rozsądnej specyficzności (31,32). Jak dotąd techniki kwasów nukleinowych nie okazały się przydatne w klinicznej diagnostyce złożonych zaburzeń równowagi mikrobiologicznej, ale mogą okazać się przydatne w przyszłości (33). Wielu badaczy poszukuje genetycznych podstaw do oceny złożonej flory mikrobiologicznej pochwy; istnieją pewne wstępne obietnice w wykorzystaniu oceny opartej na chaperoninie 60, podczas gdy inni stosują podejście oparte na RNA. Żadna z tych technik nie jest obecnie przydatna w warunkach klinicznych ze względu na złożoność i koszty, ale mogą one być bardzo cenne w przyszłości (34,35). Podsumowując, najbardziej użyteczną obecnie metodą diagnostyczną jest barwienie metodą Grama pochwy.