PMC

Atypowe limfocyty są reaktywnymi limfocytami, które są wspólne dla wielu różnych etiologii. Podczas gdy infekcje takie jak wirus Epsteina-Barr (EBV) i wirus cytomegalii są dobrze znanymi przyczynami występowania atypowych limfocytów we krwi obwodowej, sporadyczne doniesienia wskazują, że limfocyty o atypowej morfologii są obserwowane u pacjentów zakażonych nowo pojawiającym się koronawirusem 2 (SARS-CoV-2), , , , ]. Aby zbadać zakres i możliwe znaczenie atypii limfocytarnej związanej z SARS-CoV-2, oceniliśmy spektrum atypowych cech limfocytarnych w rozmazach obwodowych pobranych od 33 pacjentów z SARS-CoV-2 ze szpitala Mount Sinai w Nowym Jorku, epicentrum pandemii w Stanach Zjednoczonych.

Badanie przeprowadzono zgodnie z instytucjonalnymi protokołami IRB. Dokonaliśmy przeglądu morfologii limfocytów w 33 rozmazach krwi obwodowej, które zostały oznaczone do przeglądu patologicznego przez technologów medycznych w klinicznym laboratorium hematologicznym i porównane z inną grupą 20 rozmazów oznaczonych od pacjentów bez SARS-CoV-2 jako kontrola. U pacjentów z kohorty SARS-CoV-2 potwierdzono dodatni wynik zakażenia poprzez badanie kwasów nukleinowych SARS-CoV-2 w próbkach wymazu z gardła za pomocą RT-PCR. Atypowe cechy limfocytarne zostały zidentyfikowane, zestawione w tabelach i porównane z ich obecnością w rozmazach obwodowych z kohorty kontrolnej ujemnej. Bezwzględne liczby limfocytów i cechy morfologiczne obu grup zostały porównane i przeanalizowane pod kątem istotności statystycznej przy alfa 0,05 testem t-Studenta przy użyciu subskrypcji IBM SPSS Statistics (Armonk, NY, USA).

Jak oczekiwano, 79% (n = 26) pacjentów z SARS-CoV-2 było limfopenicznych (<1,0 × 103 μL). Atypową morfologię limfocytów zidentyfikowano u 75% (n = 25) w następujący sposób: szesnaście wykazywało wyłącznie cechy plazmacytoidalne (ryc. 1 górny rząd); pięć wykazywało cechy EBV-podobne (komórki Downey II-like) (ryc. 1, dolny rząd), a cztery wykazywały obie cechy. Łącznie, cechy plazmacytoidalne były obecne w rozmazach od 20 pacjentów, podczas gdy komórki podobne do Downeya II były obecne tylko u dziewięciu. Wśród pacjentów bez SARS-CoV-2, limfocyty o morfologii plazmacytoidalnej były nieobecne, podczas gdy sześć wykazywało limfocyty z cechami komórek Downeya II-podobnych. Częstość występowania limfocytów plazmacytoidalnych u pacjentów z SARS-CoV-2 była istotnie różna w porównaniu do pacjentów bez SARS-CoV-2 (p < .05; test t-Studenta). Szczególnie interesujący wśród pacjentów SARS-CoV-2 był związek między cechami komórek Downeya II-podobnych a prawidłową bezwzględną liczbą limfocytów (p < .05; test t Studenta) u pacjentów SARS-CoV-2.

W tym krótkim raporcie na temat morfologii limfocytów w rozmazach obwodowych pacjentów z SARS-CoV-2, potwierdzamy atypowe limfocyty jako powszechne znalezisko w rozmazach krwi od pacjentów z SARS-CoV-2, nawet w ustawieniu limfopenii. Limfocyty plazmacytoidalne występują najczęściej i są silnie związane z infekcją SARS-CoV-2, przynajmniej w środowiskach o wysokiej częstości występowania SARS-Cov-2, w tym przypadku w Nowym Jorku.

Atypowe limfocyty są heterogeniczną grupą limfocytów o zmiennych cechach morfologicznych związanych z poliklonalną odpowiedzią immunologiczną na stymulację antygenową. Pionierska praca McKinleya i Downeya w 1923 roku kategoryzująca atypowe limfocyty widziane w mononukleozie zakaźnej była jedną z pierwszych do badania takich zmian w limfocytach. W oparciu o nasze wyniki, atypowa morfologia limfocytów u pacjentów z SARS-CoV-2 może być pogrupowana w dwie główne kategorie: 1. Cechy plazmacytoidalne (ryc. 1, górny rząd): które są małymi dojrzałymi limfocytami z ekscentrycznym jądrem i głęboko niebieską cytoplazmą; zawarte w tej kategorii są komórki z cechami plazmablastycznymi, w których komórka jest nieco większa z otwartą chromatyną i widocznym jąderkiem; i 2. Komórki podobne do Downeya II (ryc. 1, niżej): duże limfocyty przylegające do otaczających czerwonych krwinek z obfitą cytoplazmą i sporadycznymi ziarnistościami cytoplazmatycznymi podobnymi w swojej morfologii do oryginalnych komórek Downeya II. Rozmaz obwodowy może wykazywać jedną z tych cech lub spektrum obu. Chociaż atypowa morfologia limfocytów nie jest rzadka w zakażeniach wirusowych w ogóle, wirusy wywołujące zapalenie płuc, w tym grypa A, SARS-1 i świńska grypa nie są powszechnie związane z atypową morfologią limfocytów. Niektóre infekcje wirusowe są związane z limfocytami plazmacytoidalnymi, w tym gorączka denga i w mniejszym stopniu różyczka. Dlatego też wyniki tego badania wskazują na unikalne cechy wirusa SARS-CoV-2, które można przypisać mechanizmom reakcji immunologicznej i dysregulacji nieczęsto obserwowanym w przypadku innych wirusów.

Nasze wyniki są zgodne z doniesieniami z różnych krajów dotkniętych pandemią SARS-CoV-2, w których opisywano atypowe limfocyty , , , ]. Jednakże, wykonując systematyczny przegląd ze szczegółową oceną morfologiczną na morfologii limfocytów, dostarczamy dowodów na zmiany, które mogą być widoczne w SARS-CoV-2. Wykazaliśmy, że atypowa morfologia limfocytów jest powszechna we krwi obwodowej pacjentów z SARS-CoV-2. W szczególności, atypowe limfocyty plazmacytoidalne są silnie związane z SARS-CoV-2, co jest nietypowe wśród infekcji wirusowych. Klasyczne komórki Downeya II-podobne, które są ogólnie powszechne w infekcjach wirusowych, są rzadziej spotykane w infekcji SARS-CoV-2.