Os linfomas difusos de grandes células B com uma assinatura de expressão molecular PMBCL representam um subtipo molecular distinto associado a um mau resultado clínico

Introdução: O ensaio DLBCL90 NanoString recentemente desenvolvido distingue robustamente o linfoma mediastinal primário de células B grandes (PMBCL) do linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), bem como os subtipos de células de origem (COO) de DLBCL (ABC, GCB, não classificado) e os casos com assinatura de duplo acerto (DHIT) (Ennishi D., JCO 2019). Quando este ensaio foi aplicado em biópsias de 343 pacientes com de novo DLBCL uniformemente tratados com R-CHOP, dezenove destes casos tinham assinatura molecular de PMBCL (mPMBCL), apesar de terem sido diagnosticados como DLBCL com base em sua morfologia, imunofenótipo e características clínicas. Aqui, objetivamos caracterizar de forma abrangente as características moleculares e clinicopatológicas destes casos de mPMBCL.

Métodos: As estimativas de sobrevivência foram calculadas usando a análise de Kaplan-Meier, usando o tempo para progressão (TTP) e a sobrevida específica da doença (DSS) como desfechos. Aplicamos seqüenciamento de todo o radar, análise do número de cópias (SNP6.0) e RNAseq para identificar mutações somáticas, aberrações do número de cópias e genes diferentemente expressos, respectivamente. FISH foi aplicado para avaliar a presença de rearranjos que afetam MYC, BCL2 e BCL6. Utilizamos dados previamente obtidos em nosso centro de uma coorte de PMBCL (n=73) para comparar mPMBCL com tumores “bona fide” de PMBCL (PMBCL) (Mottok et al, Blood 2019).

Resultados: A idade média ao diagnóstico foi significativamente maior para mPMBCL comparado com PMBCL (62 vs 37 anos, p<.001). Apenas 3 dos 19 mPMBCL apresentavam uma massa mediastinal anterior, uma marca clínica de PMBCL. É importante notar que estes casos demonstraram uma doença extratorácica extensa, o que é incomum para a PMBCL. O derrame pleural e/ou pericárdico foi observado em apenas 11% da mPMBCL comparada a 50% da PMBCL (p<.001). O envolvimento da medula óssea foi observado em 21% da mPMBCL e não observado em nenhuma PMBCL (p<.001). A mPMBCL teve uma tendência a piores resultados em comparação com a PMBCL tratada com R-CHOP (n=61) (2 anos TTP: 62% vs 77%, log-rank p=.12; DSS: 74% vs 84%, p=.10). Por atribuição COO do ensaio DLBCL90, 16 dos 19 mPMBCL foram categorizados como GCB-DLBCL. Comparado aos outros GCB-DLBCL em nossa coorte DLBCL (excluindo casos DHIT-positivos), o mPMBCL teve resultados inferiores (2 anos TTP: 62% vs 87%, log-rank p=.03; DSS: 72% vs 89%, p=.02). Não houve diferenças significativas nas características clínicas basais entre mPMBCL e GCB-DLBCL.

Comparação do panorama mutacional de mPMBCL para PMBCL demonstrou perturbações nas características centrais da patogênese de PMBCL: Sinalização JAK/STAT, activação da via NF-ĸB e evasão imunológica. As aberrações genômicas que afetam a sinalização JAK-STAT foram compartilhadas entre mPMBCL e PMBCL, com SNVs ou indels afetando IL4R, STAT6 e SOCS1 encontrados em 37%, 37% e 89% de mPMBCL e 36%, 40% e 69% de PMBCL, respectivamente. Além disso, a análise do número de cópias revelou amplificações JAK2 em 44% dos mPMBCL (71% dos PMBCL) e a análise de expressão diferencial de genes mostrou níveis aumentados de CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) e genes pertencentes à rede de sinalização JAK-STAT em mPMBCL. Em contraste, essas aberrações genéticas raramente foram observadas em um estudo recente de seqüenciamento de 360 tumores DLBCL primários (Chapuy B., Nat.Med. 2018). Mutações também foram observadas nas vias NF-ĸB mas os padrões de mutações foram distintos entre mPMBCL (BIRC3 e BTK) e PMBCL (NKBIE) sugerindo biologia convergente com mecanismos alternativos de desregulação das vias. Similarmente, mPMBCL abrigou diferentes mutações (CD83) implicadas na evasão imunológica em comparação com PMBCL (B2M).

Finalmente, comparamos o cenário mutacional do mPMBCL com subgrupos de DLBCL recentemente descritos geneticamente. Curiosamente, a grande maioria dos mPMBCL abrigava pelo menos uma das mutações características do “Cluster 4” (incluindo CD83, HIST1H1E, SGK1), um subconjunto de DLBCLs definido por Chapuy et al que inclui predominantemente GCB-DLBCLs.

Conclusion: Identificamos e caracterizamos um subgrupo de DLBCL que expressa a assinatura de expressão do gene PMBCL. Similar ao PMBCL de boa fé, estes tumores são caracterizados por aberrações genômicas que afetam a sinalização JAK-STAT, NF-ĸB e a resposta imune. No entanto, nossos dados sugerem que a desregulação das duas últimas vias é estabelecida através de modos evolutivos distintos que se refletem em padrões de mutação diferencial e apresentações anatômicas e clínicas. Nossos achados fornecem potenciais novos caminhos terapêuticos para este subconjunto de linfoma.

Sarkozy:Takeda: Financiamento da pesquisa. Savage:BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier, e Seattle Genetics: Consultoria, Honoraria; Seattle Genetics, Inc.; Seattle Genetics, Inc: Consultoria, Honoraria, Financiamento de Pesquisa. Scott:Celgene: Consultoria; Roche/Genentech: Financiamento de Pesquisa; Janssen: Consultoria, Financiamento de Pesquisa; NanoString: Patentes & Royalties: Nome do inventor de uma patente licenciada ao NanoSting , Research Funding. Steidl:Bristol-Myers Squibb: Financiamento da Pesquisa; Nanostring: Patentes & Royalties: Patente registrada em nome da BC Cancer; Juno Therapeutics: Consultoria; Tioma: Financiamento da pesquisa; Roche: Consultoria; Bayer: Consultoria; Seattle Genetics: Consultancy.