Limfoamele difuze cu celule B mari difuze cu o semnătură moleculară de expresie PMBCL reprezintă un subtip molecular distinct asociat cu un rezultat clinic slab

Introducere: Testul DLBCL90 NanoString dezvoltat recent distinge în mod robust limfomul mediastinal primar cu celule B mari (PMBCL) de limfomul difuz cu celule B mari (DLBCL), precum și subtipurile de celule de origine (COO) ale DLBCL (ABC, GCB, neclasificat) și cazurile cu o semnătură Double-Hit (DHIT) (Ennishi D., JCO 2019). Atunci când acest test a fost aplicat la biopsii de la 343 de pacienți cu DLBCL de novo, tratați uniform cu R-CHOP, nouăsprezece dintre aceste cazuri au avut o semnătură moleculară PMBCL (mPMBCL), în ciuda faptului că au fost diagnosticați ca DLBCL pe baza morfologiei, a imunofenotipului și a caracteristicilor clinice. Aici, ne-am propus să caracterizăm în mod cuprinzător caracteristicile moleculare și clinico-patologice ale acestor cazuri de mPMBCL.

Metode: Estimările de supraviețuire au fost calculate cu ajutorul analizei Kaplan-Meier, folosind timpul până la progresie (TTP) și supraviețuirea specifică bolii (DSS) ca puncte finale. Am aplicat secvențierea întregului exom, analiza numărului de copii (SNP6.0) și RNAseq pentru a identifica mutațiile somatice, aberațiile numărului de copii și, respectiv, genele exprimate diferențiat. S-a aplicat FISH pentru a evalua prezența rearanjamentelor care afectează MYC, BCL2 și BCL6. Am utilizat date obținute anterior în cadrul centrului nostru dintr-o cohortă de PMBCL (n=73) pentru a compara mPMBCL cu tumorile PMBCL „bona fide” (PMBCL) (Mottok et al, Blood 2019).

Rezultate: Vârsta mediană la diagnostic a fost semnificativ mai mare pentru mPMBCL comparativ cu PMBCL (62 vs 37 de ani, p<.001). Doar 3 din 19 mPMBCL au prezentat o masă mediastinală anterioară, un semn clinic distinctiv al PMBCL. Este important faptul că aceste cazuri au demonstrat o boală extratoracică extinsă, ceea ce este neobișnuit pentru PMBCL. Revărsarea pleurală și/sau pericardică a fost observată în doar 11% din mPMBCL, comparativ cu 50% din PMBCL (p<.001). Afectarea măduvei osoase a fost observată la 21% din mPMBCL și nu a fost observată la niciun PMBCL (p<.001). mPMBCL au avut o tendință spre rezultate mai proaste în comparație cu PMBCL tratate cu R-CHOP (n=61) (TTP la 2 ani: 62% vs 77%, log-rank p=.12; DSS: 74% vs 84%, p=.10). Prin atribuirea COO a testului DLBCL90, 16 din 19 mPMBCL au fost clasificate ca GCB-DLBCL. Comparativ cu celelalte GCB-DLBCL din cohorta noastră de DLBCL (excluzând cazurile pozitive la semnătura DHIT), mPMBCL au avut rezultate inferioare (TTP la 2 ani: 62% vs 87%, log-rank p=.03; DSS: 72% vs 89%, p=.02). Nu au existat diferențe semnificative în ceea ce privește caracteristicile clinice de bază între mPMBCL și GCB-DLBCL.

Compararea peisajului mutațional al mPMBCL cu PMBCL a demonstrat perturbări în semnele centrale ale patogenezei PMBCL: semnalizarea JAK/STAT, activarea căii NF-ĸB și evaziunea imunitară. Aberațiile genomice care afectează semnalizarea JAK-STAT au fost împărtășite între mPMBCL și PMBCL, cu SNV-uri sau indeluri care afectează IL4R, STAT6 și SOCS1 găsite în 37%, 37% și 89% din mPMBCL și 36%, 40% și 69% din PMBCL, respectiv 36%, 40% și 69% din PMBCL. Mai mult, analiza numărului de copii a evidențiat amplificări JAK2 în 44% din mPMBCL (71% din PMBCL) și analiza diferențială a expresiei genice a arătat niveluri crescute de CD274 (PDL1), PDCD1LG2 (PDL2) și gene aparținând rețelei de semnalizare JAK-STAT în mPMBCL. În schimb, aceste aberații genetice au fost rareori observate într-un studiu recent de secvențiere a întregului exom pe 304 tumori primare de DLBCL (Chapuy B., Nat.Med. 2018). S-au observat, de asemenea, mutații în căile NF-ĸB, dar modelele de mutații au fost distincte între mPMBCL (BIRC3 și BTK) și PMBCL (NKBIE), sugerând o biologie convergentă cu mecanisme alternative de dereglare a căilor. În mod similar, mPMBCL a găzduit mutații diferite (CD83) implicate în evaziunea imunitară în comparație cu PMBCL (B2M).

În cele din urmă, am comparat peisajul mutațional al mPMBCL cu subgrupuri recent descrise genetic definite de DLBCL. În mod interesant, o mare majoritate a mPMBCL a găzduit cel puțin una dintre mutațiile caracteristice „Clusterului 4” (incl. CD83, HIST1H1E, SGK1), un subgrup de DLBCL definit de Chapuy et al care include predominant GCB-DLBCL.

Concluzie: Am identificat și caracterizat un subgrup de DLBCL care exprimă semnătura de expresie genetică PMBCL. Similar cu PMBCL de bună credință, aceste tumori sunt caracterizate de aberații genomice care afectează semnalizarea JAK-STAT, NF-ĸB și răspunsul imunitar. Cu toate acestea, datele noastre sugerează că dereglarea ultimelor două căi se stabilește prin moduri evolutive distincte care se reflectă în modelele de mutații diferențiate și în prezentările anatomice și clinice. Descoperirile noastre oferă potențiale căi terapeutice noi pentru acest subset de limfom.

Sarkozy:Takeda: Finanțarea cercetării. Savage:BMS, Merck, Novartis, Verastem, Abbvie, Servier și Seattle Genetics: Consultanță, onorarii; Seattle Genetics, Inc.: Consultanță, onorarii, finanțare pentru cercetare. Scott:Celgene: Consultanță; Roche/Genentech: Finanțare pentru cercetare; Janssen: Consultanță, finanțare pentru cercetare; NanoString: Brevete & Redevențe: Inventator numit pe un brevet licențiat către NanoSting , Finanțare pentru cercetare. Steidl: Bristol-Myers Squibb: Finanțare pentru cercetare; Nanostring: Brevete & Redevențe: A depus un brevet în numele BC Cancer; Juno Therapeutics: Consultanță; Tioma: Finanțare pentru cercetare; Roche: Consultanță; Bayer: Consultanță; Seattle Genetics: Consultanță.