PMC

Performanțe legate de tipul de probă și limitări ale testelor de diagnostic

Există două categorii principale de teste de diagnostic pentru BV: criterii clinice și teste de laborator.

Cele mai larg acceptate criterii clinice sunt „criteriile lui Amsel” (23). Acest diagnostic clinic presupune îndeplinirea a trei dintre următoarele patru criterii: în primul rând, un pH vaginal mai mare de pH 4,5; în al doilea rând, prezența celulelor clue în lichidul vaginal; în al treilea rând, o secreție vaginală lăptoasă și omogenă; și, în sfârșit, eliberarea unui miros de amină (de pește) după adăugarea de hidroxid de potasiu 10% în lichidul vaginal (23). pH-ul poate fi determinat direct cu ajutorul unor bețișoare de pH plasate pe peretele vaginal sau cu ajutorul unui tampon care este atins pe hârtie de pH în intervalul care acoperă de la pH 4,0 la pH 6,5. Tamponul este apoi extras în 0,2 ml de soluție salină fiziologică, fie pe o lamelă de sticlă, fie într-o eprubetă; o picătură din extract este apoi plasată pe o lamelă de sticlă. O picătură de hidroxid de potasiu 10% se pune pe o altă lamă de sticlă. Tamponul se agită apoi în hidroxidul de potasiu 10% și se evaluează imediat pentru a detecta prezența unui miros de pește. Ambele picături sunt apoi acoperite cu o lamelă de acoperire și examinate la o mărire de 400x cu un microscop optic. Celulele indiciale sunt identificate ca fiind celule epiteliale vaginale cu un strat atât de gros de bacterii încât marginile periferice sunt ascunse. Dacă sunt îndeplinite trei din cele patru criterii, atunci se poate pune diagnosticul clinic de BV.

Pentru metoda de testare în laborator, proba preferată este un frotiu vaginal nefixat trimis la laborator pentru a fi colorat Gram prin metode standard. Lamina colorată este citită, iar numărul de morfotipuri este evaluat pe baza unei metode standardizate de notare. Criteriile de diagnostic elaborate de Spiegel et al. (24) și modificate ulterior de Nugent et al. (25) au fost o metodă standardizată de punctare a colorației Gram bine reprodusă (tabelul (tabelul11).

TABELUL 1

Sistemul de punctare (0-10) pentru colorația Gram-.stained vaginal smears

Score Lactobacillus morphotypes Gardnerella and Bacteroides species morphotypes Curved Gram-variable rods
0 4+ 0 0
1 3+ 1+ 1+ or 2+
2 2+ 2+ 3+ or 4+
3 1+ 3+
4 0 4+

1+ ≤ 1/1000x câmp; 2+ = 1-5/1000x câmp; 3+ = 6-30/1000x câmp; 4+ ≥ 30/1000x câmp

În metodologia lui Nugent et al. (25), tamponul a fost obținut din peretele vaginal lateral și rulat pe o lamă de sticlă. Frotiurile au fost apoi fixate termic și colorate Gram folosind safranina ca și contracolorant. Frotiul a fost apoi evaluat pentru următoarele morfotipuri sub imersie în ulei (mărire de 1000x): tije Gram-pozitive mari (morfotipuri de lactobacillus), tije Gram-variabile mici (morfotipuri de G vaginalis), tije Gram-negative mici (morfotipuri de specii de Bacteroides), tije Gram-variabile curbe (morfotipuri de specii de Mobiluncus) și cocci Gram-pozitivi. Deși cocoșii Gram-pozitivi nu fac parte din sistemul de notare, unele laboratoare îi vor raporta dacă sunt prezenți în număr semnificativ. Un număr crescut de cocci Gram-pozitivi nu face parte din tiparul florei vaginale normale. De remarcat că sistemul de punctare Nugent a produs o îmbunătățire a acordului intercentre în comparație cu criteriile publicate anterior (24), dar o metodă standardizată de punctare este cea mai importantă abordare.

Un scor de la zero la trei este considerat normal, de la patru la șase este considerat intermediar, iar de la șapte la zece este definit ca BV. Flora vaginală intermediară este raportată clinicianului pentru a fi gestionată în funcție de contextul clinic. Treizeci și doi la sută dintre pacientele cu un scor intermediar vor trece la BV și 30% la o floră normală. Mulți autori consideră că un scor intermediar ar trebui să fie inclus ca fiind anormal, având în vedere rata ridicată de trecere la BV. Decizia de reverificare sau de tratament se bazează pe riscul clinic de a trece la BV (26). Acest sistem de punctaj se corelează bine cu boala clinică (18). Metodologia clinică este utilă, deoarece permite un răspuns imediat în anumite situații clinice urgente, dar metoda colorației Gram pare a fi mai precisă (27-29). Cu toate acestea, în sarcină, în contextul rupturii membranelor, are o valoare predictivă negativă bună (83%), dar o sensibilitate slabă (30).

Au fost propuse metode de diagnostic alternative, dar niciuna nu este în prezent mai bună decât metodologia standardizată a colorației Gram. Utilizarea cromatografiei gaz-lichid, a culturilor vaginale și a frotiurilor Papanicolaou cu preparat lichid au fost propuse ca metode alternative de diagnostic datorită avantajului practic al prelevării de probe și al transportului comun la laborator. Până la momentul redactării acestui document, acest lucru a fost realizat doar în medii de cercetare și ar necesita schimbări semnificative în abordarea citirii frotiurilor. Există rapoarte variabile privind o lipsă generală de sensibilitate, dar o specificitate rezonabilă (31,32). Până în prezent, tehnicile cu acid nucleic nu s-au dovedit a fi utile pentru diagnosticul clinic al dezechilibrului microbian complex, dar s-ar putea dovedi utile în viitor (33). Mulți cercetători explorează o bază genetică pentru evaluarea florei microbiene complexe a vaginului; există o promisiune preliminară în ceea ce privește utilizarea evaluărilor bazate pe chaperonina 60, în timp ce alții utilizează o abordare bazată pe ARN. Niciuna dintre aceste tehnici nu este utilă în prezent în mediul clinic din cauza complexității și a costurilor, dar acestea ar putea fi foarte valoroase în viitor (34,35). În concluzie, cea mai utilă metodă de diagnosticare actuală este colorația Gram vaginală.

.