PMC

Limfocitele atipice sunt limfocite reactive care sunt comune unei mari varietăți de etiologii. În timp ce infecții precum virusul Epstein-Barr (EBV) și citomegalovirusul sunt cauze bine cunoscute ale limfocitelor atipice în sângele periferic, rapoarte sporadice indică faptul că limfocitele cu morfologie atipică sunt observate la pacienții infectați cu coronavirusul 2 al sindromului respirator acut sever (SARS-CoV-2) , , , , ], recent apărut. Pentru a explora amploarea și posibila semnificație a atipicității limfocitare legate de SARS-CoV-2, am evaluat spectrul caracteristicilor limfocitare atipice în frotiurile periferice recoltate de la 33 de pacienți cu SARS-CoV-2 de la Spitalul Mount Sinai din New York, epicentrul pandemiei din Statele Unite.

Studiul a fost efectuat în conformitate cu protocoalele IRB instituționale. Am analizat morfologia limfocitelor în 33 de frotiuri de sânge periferic care au fost marcate pentru a fi examinate de către patologi de către tehnologii medicali din laboratorul de hematologie clinică și le-am comparat cu un alt grup de 20 de frotiuri marcate de la pacienți fără SARS-CoV-2, ca martor. Pacienții din cohorta SARS-CoV-2 au fost confirmați ca fiind pozitivi la infecție prin testarea cu acid nucleic SARS-CoV-2 a specimenelor de tampoane de gât cu ajutorul RT-PCR. Caracteristicile limfocitare atipice au fost identificate, tabelate și comparate cu prezența lor în frotiurile periferice din cohorta de control negativ. Numărul absolut de limfocite și caracteristicile morfologice ale celor două grupuri au fost comparate și analizate pentru semnificație statistică la 0,05 alfa prin testul t al lui Student folosind abonamentul IBM SPSS Statistics (Armonk, NY, SUA).

Așa cum era de așteptat, 79 % (n = 26) dintre pacienții cu SARS-CoV-2 au fost limfopeni (<1,0 × 103 μL). Morfologia limfocitară atipică a fost identificată la 75 % (n = 25), după cum urmează: șaisprezece au prezentat doar caracteristici plasmocitoide (Fig. 1Rândul de sus); cinci au prezentat caracteristici asemănătoare EBV (celule asemănătoare Downey II) (Fig. 1, rândul de jos), iar patru au prezentat ambele caracteristici. Colectiv, trăsăturile plasmocitoide au fost prezente în frotiurile de la 20 de pacienți, în timp ce celulele de tip Downey II au fost prezente doar la nouă. În rândul pacienților fără SARS-CoV-2, limfocitele cu morfologie plasmocitoidă au fost absente, în timp ce șase au prezentat limfocite cu caracteristici de celule de tip Downey II. Frecvența limfocitelor plasmocitoide la pacienții cu SARS-CoV-2 a fost semnificativ diferită în comparație cu cei fără SARS-CoV-2 (p < 0,05; testul t al lui Student). De un interes deosebit în rândul pacienților cu SARS-CoV-2 a fost o asociere între caracteristicile celulelor de tip Downey II și numărul absolut normal de limfocite (p < .05; testul t Student) la pacienții cu SARS-CoV-2.

În acest scurt raport al morfologiei limfocitelor în frotiurile periferice ale pacienților cu SARS-CoV-2, confirmăm că limfocitele atipice sunt o constatare comună în frotiurile de sânge de la pacienții cu SARS-CoV-2 chiar și în contextul limfopenie. Limfocitele plasmocitoide sunt cel mai frecvent întâlnite și sunt foarte asociate cu infecția cu SARS-CoV-2, cel puțin în mediile cu prevalență ridicată a SARS-CoV-2, în acest caz New York City.

Limfocitele atipice sunt un grup eterogen de limfocite cu caracteristici morfologice variabile asociate cu un răspuns imun policlonal la stimularea antigenică. Lucrarea de pionierat a lui McKinley și Downey din 1923, care a clasificat limfocitele atipice observate în mononucleoza infecțioasă, a fost una dintre primele care a studiat astfel de modificări ale limfocitelor . Pe baza constatărilor noastre, morfologia atipică a limfocitelor la pacienții cu SARS-CoV-2 ar putea fi grupată în două categorii principale: 1. Trăsături plasmocitoide (Fig. 1, rândul superior): care sunt limfocite mature mici cu un nucleu excentric și citoplasmă de culoare albastru închis; în această categorie sunt incluse celulele cu trăsături plasmocitoide în care celula este ușor mai mare, cu cromatină deschisă și nucleol proeminent; și 2. Celule asemănătoare cu Downey II (Fig. 1, partea inferioară jos): limfocite mari care se lipesc de globulele roșii din jur, cu citoplasmă abundentă și cu granule citoplasmatice ocazionale, similare în morfologia lor cu celulele Downey II originale . Un frotiu periferic poate prezenta oricare dintre aceste caracteristici sau un spectru al ambelor. Deși morfologia atipică a limfocitelor nu este neobișnuită în infecțiile virale în general, virusurile care cauzează pneumonie, inclusiv gripa A, SARS-1 și gripa porcină, nu sunt asociate în mod obișnuit cu morfologia limfocitară atipică . Câteva infecții virale sunt asociate cu limfocite plasmocitoide, inclusiv febra Dengue și, într-o măsură mai mică, rubeola . Prin urmare, rezultatele acestui studiu evidențiază caracteristicile unice ale virusului SARS-CoV-2, care pot fi atribuite unor mecanisme de reacție și de dereglare imunitară care nu sunt observate frecvent în cazul altor virusuri.

Rezultatele noastre sunt în concordanță cu rapoartele din diferite țări afectate de pandemia SARS-CoV-2, în care au fost descrise limfocite atipice , , , , ]. Cu toate acestea, prin efectuarea unei revizuiri sistematice cu evaluare morfologică detaliată asupra morfologiei limfocitelor, oferim dovezi ale modificărilor care pot fi observate în SARS-CoV-2. Am arătat că morfologia limfocitară atipică este frecventă în sângele periferic al pacienților cu SARS-CoV-2. În mod specific, limfocitele plasmacitoide atipice sunt foarte asociate cu SARS-CoV-2, ceea ce este neobișnuit în rândul infecțiilor virale. Celulele clasice de tip Downey II, care sunt în general frecvente în infecțiile virale, sunt mai rar întâlnite în infecția SARS-CoV-2.

.